أخبار

أو. مبدأ تقنية بكر

هذا العام ، يدور حول العالم ، ولابد أن الجميع قد سمعوا عن اختبار الحمض النووي. في الكشف عن الحمض النووي للوباء ، تلعب تقنية الفلورة بالبولي إيثنيل كلورايد دورا مركزيا ، مما يمكن أن يساعد المفتشين على تحديد ما إذا كانوا مصابين بالعدوى بسرعة ودقة.

إذن ما هي تقنية بتقنية بسي آر بالضبط ؟

الكلور هو اختصار لتفاعل البوليميراز المتسلسل. باختصار ، يتكون البكر من ثلاث خطوات تفاعل أساسية: تمسخ درجة الحرارة العالية-درجة حرارة منخفضة التلدين-تمديد درجة الحرارة المتوسطة:

1. تمسخ الحمض النووي ليصبح أحادي الشريط

بعد تسخين نموذج الحمض النووي إلى حوالي 95 درجة مئوية لفترة معينة من الزمن ، يتم فصل حبلا الحمض النووي المزدوج للقالب إلى شريط واحد بحيث يمكن ربطه بالتمهيدي والاستعداد للجولة التالية من التفاعل.

2. درجة حرارة منخفضة الصلب

بعد أن يتم تشذيب نموذج الحمض النووي إلى خيوط مفردة ، يتم خفض درجة الحرارة إلى حوالي 55 درجة مئوية ، ويتم إقارنة الأوليات بالتسلسلات التكميلية لقالب الحمض النووي الفردي.

3. تمديد درجة الحرارة المتوسطة

تحت عمل إنزيم Taq ، يستخدم قالب الحمض النووي والترابيس الأولية dNTP كمادة خام للتفاعل والتسلسل المستهدف كقالب ، وفقًا لمبدأ الاقتران الأساسي والتكرار شبه المحجوز ، وأخيرًا تجميع سلسلة نسخ جديدة شبه محفوظة مكملة لسلسلة قالب الحمض النووي.

Ⅱ. طرق الكشف عن الفلورسنت بكر

في الوقت الحالي ، تستخدم معظم كواشف الكشف المعتمدة من قبل إدارة الدواء الحكومية في الصين طرق الفلورسنت للكشف عن!!

تشير طريقة الفلورسنت إلى إضافة مجموعات الفلورسنت إلى نظام رد فعل بكر. مع تقدم تضخيم بزر ، تستمر منتجات التفاعل في التراكم ، وتزداد كثافة الإشارة الفلورية أيضًا بشكل تناسبي. الرسم البياني لمنحنى تضخيم الفلورسنت ، الكشف في الوقت الحقيقي لعملية الفلورة بزر.

نفسجي. مبادئ اختيار مستهلكات الفلورسنت بتحكم بتحكم في الخلايا الفلورية

1. المواد

يتكون PCR بشكل عام من مادة PP ، لأن المواد الاستهلاكية PCR/qPCR عادة ما تكون على اتصال مباشر مع الكواشف أو العينات ، في حين أن مادة البولي بروبيلين (PP) هي مادة خاملة بيولوجيًا ، فإن السطح ليس من السهل الالتزام بالجزيئات الحيوية ، وله مقاومة كيميائية جيدة ودرجة الحرارة. التسامح (يمكن تعقيبها عند 121 درجة مئوية ويمكنها أيضًا تحمل التغيرات في درجات الحرارة أثناء ركوب الدراجات الحرارية). المواد الاستهلاكية بكر هي جميع المواد PP.

2. حجم أنبوب/لوحة بكر

كيف نختار أنابيب/ألواح بأحجام مختلفة ؟

الغرض من الاختيار: حدد المنتج المناسب وفقًا للمتطلبات التجريبية المحددة. حجم أنابيب بكر يمكن أن تلبي في الغالب متطلبات ردود الفعل بكر. أنابيب بكر مثالية لتجارب إنتاجية منخفضة إلى متوسطة ، مع أنابيب واحدة وشرائط كونها التنسيقين الأكثر شيوعا.

يوفر أنبوب واحد المرونة لتعيين العدد الدقيق لردود الفعل للتشغيل. بدلاً من ذلك ، يمكن اختيار أنبوب 0.5 واحد لأحجام التفاعل الأكبر.

تتوفر الوصلات عادة بتنسيق 8 أو 12 أنبوبًا مع أغطية منفصلة أو مع أغطية. متوافقة مع ماصيات أحادية القنوات ومتعددة القنوات لتجارب الإنتاجية المنخفضة والمتوسطة. شرائط مع أغطية مفتوحة وإغلاق أنابيب العينات بشكل مستقل لمنع تلوث العينات.

سمك 3. Wall

يؤثر سمك جدار الأنبوب بشكل مباشر على التوصيل الحراري ، كما أن سماكة الجدار الرقيقة للغاية تعمل على تحسين نقل الحرارة وتقليل وقت الدورة. إن البلاستيك الفائق الرقيقة للجدار أرق من الإصدار القياسي بحوالي ٪ ، مما يقلل من الحاجز الحراري ، مما يؤدي إلى استجابة أسرع وأكثر قوة. مستهلكات بكر كلها جدران أنبوبية رقيقة جدا.

4. اللون

غالبًا ما تتوفر لوحات بالألوان المختلفة في مجموعة متنوعة من تنسيقات الألوان المختلفة لتسهيل التمايز البصري وتحديد العينات ، خاصة في التجارب عالية الإنتاجية. بالنسبة لتفاعلات البكر العادية ، من الممكن استخدام أنابيب بكر شفافة أو ملونة ، وأنابيب بكر الشفافة هي أكثر فائدة لإدارة تصنيف العينات.

على الرغم من أن لون البلاستيك ليس له تأثير على تضخيم الحمض النووي ، يوصى باستخدام مستهلكات عالية الجودة من مادة البولي كريسيرايد البيضاء لـ qcr. بما أن qcr يتطلب الكشف الكمي في الوقت الفعلي لكثافة الإشارة الفلورية ، فإن نقل الإشارة الفلورية الحساسة والدقيقة مطلوب. وقد أظهرت التجارب أنه ، مقارنة بالمنتجات التقليدية الشفافة من مركبات الكربون الكلورو فلورية ، يمكن أن تعكس المنتجات البيضاء إشارة الفلورسنت إلى أقصى حد ، والحد من التلوث المتبادل للإشارات الفضائية ، والحصول على نتائج من مركبات الكربون الكلورو فلورية الكمية في الوقت الحقيقي.

ماركات مختلفة من الأدوات ، بسبب التصميم المختلف لكاشف الفلورسنت ، يرجى الرجوع إلى المواد الموصى بها من قبل الشركة المصنعة. بالنسبة لأداة CFX CFX أو Roche 480 في الوقت الفعلي ، توصي الشركة المصنعة باستخدام ألواح PCR البيضاء. لأن لوحة PCR بيضاء أو شفافة ، ولها مواصفات مختلفة ، فهي مناسبة لأدوات PCR الشائعة في السوق.